目的: 通过建立大鼠肾病综合征模型，检测他克莫司干预后，多药耐药基因1（MDR1）及其蛋白产物P-糖蛋白170(P-gp170)在激素疗效不佳肾病综合征大鼠肾组织中的表达水平情况，探讨他克莫司治疗激素耐药型肾病综合征可能的作用机制及其临床意义。
 

方法: 将健康雄性、体重（180～200）g的SD大鼠，适应性喂养1周后，称体重，检测24小时尿蛋白，将体重相当、尿蛋白定量正常的SD大鼠（n=100）随机分为造模组（n=80）和假手术组（n=20）。造模组大鼠以10%水合氯醛腹腔注射麻醉（3.0ml/kg），在无菌条件下行背侧纵切口，摘除左侧肾脏，手术后1周、3周尾静脉注射阿霉素（ADM，盐酸多柔比星），剂量分别为5mg/kg及2mg/kg。假手术组大鼠同样背侧纵切口，只剥离至肾脏被膜后缝合，给其尾静脉注射同样容量的0.9%的生理盐水。造模第4周检测24小时大鼠尿蛋白，72只大鼠造模成功。SD大鼠共分五组，A组：对照组（假手术组），自由摄入饲料和水，检测12周；B组：（模型组）建立大鼠肾病综合征模型，自由摄入饲料和水，检测12周；C组：泼尼松治疗组（激素敏感组）：肾病综合征模型建立后，予醋酸泼尼松（10mg/kg·d）灌胃治疗，将激素治疗有效的大鼠分为一组，检测8周；D组：他克莫司治疗组，肾病综合征模型建立后，醋酸泼尼松上述剂量灌胃治疗4周，将部分治疗无效的大鼠，予他克莫司（0.5mg/kg·d）灌胃治疗4周；E组：（激素耐药组），建立肾病综合征模型后，泼尼松上述剂量灌胃治疗4周失败后，他克莫司等剂量的溶媒处理4周，共8周。A组、B组同时给等剂量的溶媒灌胃治疗。分别于实验第0周、4周、6周、8周、12周末大鼠内眦采血检测生化指标，大鼠代谢笼收集24小时尿，检测大鼠24小时尿蛋白。8周末处死部分老鼠，12周末实验结束，采集标本后处死剩余所有大鼠，取肾组织做石蜡蜡块行HE、Masson染色，光镜下观察大鼠肾组织病理改变；电镜下观测肾小球足突变化，用实时荧光定量 PCR(Real time-PCR)检测肾组织中 MDR1 的表达，用免疫组织化学方法检测肾组织中 P-gp170 的表达。所用药物剂量，是将人的临床剂量按照大鼠的单位体重量折算系数换算成大鼠的治疗量。
 

结果: ：(1) 各组大鼠肾组织中均有MDR1及P-gp170的表达。(2) 第8周末B组、C组、D组、E组等大鼠肾组织MDR1 及P-gp170的表达均明显高于A组(P<0.05)。 (3) C组大鼠肾组织MDR1 及P-gp170的表达明显高于B组(P<0.01)。(4) 第12周末D组大鼠肾组织MDR1 及P-gp170的表达较第8周末降低(P<0.05)，第12周末D组肾组织MDR1 及P-gp170的表达量较C组降低(P<0.01)。(5) 大鼠肾组织 MDR1及其蛋白表达量做相关分析，结果显示转录水平与蛋白水平的表达高度相关 （r=0.93，P <0.05）(6) E组肾脏近曲小管P-gp170的表达与24小时尿蛋白定量呈明显正相关(r=0.84，P<0.05)。(7) 第12周末B组、C 组、D组、E组大鼠肾脏光镜下均有病变，电镜下有足突融合，E组较C组病变程度重。

结论: 1、激素疗效不佳肾病综合征大鼠肾组织中MDR1及P-gp170的表达增高。
2、激素的应用可能导致激素疗效不佳肾病综合征大鼠肾组织中MDR1及P-gp170过度表达。
3、逆转激素疗效不佳肾病综合征大鼠肾组织中P-gp170的高表达可能是他克莫司治疗激素疗效不佳肾病综合征作用机制之一。